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Dosaggi:

  • dosaggio enzimatico colorimetrico di colesterolo totale, trigliceridi, colesterolo HDL, glicemia , AST, ALT
  • dosaggio immunonefelometrico di apolipoproteine AI e B, Proteina C reattiva.

Elettroforesi

  • SDS PAGE : analisi qualitativa e semiquantitativa della composizione proteica delle lipoproteine.
  • elettroforesi in gradiente (GGE): analisi delle dimensioni (size) delle sottofrazioni delle lipoproteine (LDL, HDL) ottenute da ultracentrifugazione
  • Isoelettrofocusing (IEF): analisi delle isoforme delle apoliporoteine (accoppiato a Western Blot)
  • Elettroforesi in gel di agarosio (AGE) : analisi della migrazione per carica elettrica di superficie delle proteine e lipoproteine

Tecniche immunologiche:

  • Western Blot: identificazione di apolipoproteine e proteine associate al metabolismo lipidico (accoppiato a tecniche elettroforetiche)
  • ELISA: dosaggio quantitativo di apolipoproteine e proteine associate al metabolismo lipidico
  • Immunoistochimica a fluorescenza: visualizzazione di proteine cellulari si preparati istologici o cellule in coltura (accoppiato a microscopia ottica a fluorescenza)

Tecniche fluorimetriche:

  • Misura del trasporto inverso di colesterolo mediato da CETP da HDL sintetiche contententi un analogo fluorescente del colesterolo ad LDL normali (accoppiato a FPCL delle lipoproteine)
  • Misura del legame colesterolo-proteine tramite cinetica di un analogo fluorescente del colesterolo in piastra nera o mediante visulizzazione in elettroforesi.
  • Misura della funzione recettoriale tramite internalizzazione cellulare di lipoproteine e proteine fluorescenti in sistemi cellulari in coltura.
  • Misura fluorimetrica della componente lipidica di sistemi cellulari in coltura o di preparati istologici tramite colorazione fluorescente in Nile Red(accoppiato a microscopia ottica a fluorescenza)

Tecniche cromatografiche:

  • Fast Performance chromatography (FPLC): cation exchange, anion exchange, el filtration di proteine e lipoproteine,
  • High Pressure liquid chromatography (HPLC):
    • reverse phase C18, gel filtration di proteine
    • gel filtration di proteine
  • Gas cromatografia /spettrometria di massa (GC/MS) *:
    • analisi di steroli, acidi grassi, sfingolipidi plasmatici e bioptici.
    • metabolomica: circa 50 piccoli metaboliti (zuccheri, piccoli acidi organici etc.)

Ultracentrifugazione:

  • Isolamento delle lipoproteine per densità (UC sequenziale)
  • ultracentrifugazione continua in gradeinte di densità (DGUC)